饲料猪的养殖技术，农业养殖猪技术
养猪技术
生料湿喂法。当前，许多养猪专业户都采用生料湿喂法。这种方法比熟料稀喂法简单，而且比较科学。在饲喂前，只要把粉碎的精粗饲料和其他饲料按规定比例及总需要量搭配好，加上切碎或打成浆的青饲料和水（一般料与水的比例为1∶0.8～1），搅拌均匀，就可以喂猪。
生料湿喂省柴、省工、省设备，可降低养猪成本。
但生料湿喂法也有一些缺点，主要是湿饲料不宜存放，仍需按顿调制和饲喂，在寒冷的冬季还容易结冰。
养猪技术员
配种！
一般人会建议你学兽医，疾病诊治是最难的，技术要求和经验都非常高,觉得他最吃香！其实，规模化猪场，配种员才是最难的，最吃香的！配种员能根据母猪的品种、胎次、季节气候等等条件，掌握好配种的时间，外三元猪能保证每窝达到15头以上，现在找个年入20万的工作轻松愉快！主要是活路还不累,比较轻松！
养猪技术app哪个好
这款游戏是2018年的时候出来的那个时候比较火。
养猪技术宝典
道氏养猪宝典，谢谢朋友的邀请！
产前三天的母猪饲养工作分为以下几点：
①环境管理：母猪产房的温度一定要控制好，母猪产房最适宜的温度是25℃-28℃。
②产前乳房温水擦洗，酒精擦洗消毒，避免小猪吃到细菌。
③母猪产前的吃料需要适当的控制，避免产后肠道积食引起便秘
④饮水，勤检查饮水器，避免出现饮水量不够导致产后便秘
⑤母猪上产床前产床一定是清洗干净的，干燥的。
⑥母猪产前后驱温水清洗干净。
⑦舒适的环境，通风，干燥，干净。
⑧最佳湿度：65%-70%
道氏养猪宝典总结以上8点希望能对朋友有所帮助！
养猪技术员具体做什么
养猪技术员工作是比较累的，现代养猪大部分都是大型的，现代化，为了确保环境保护工作到位，所有养豬都是大型化，环保型和科学养殖，这就给养猪技术员工作增加了很大压力，既要饲养出供应市埸的符合各项标准的肉猪，又要确保环保，科学养殖，因此养猪技术员工作是比較累的。
养猪技术教程大全视频
养殖行业一直想要寻求一种可以降低成本的养殖模式，不管是从饲料入手、还是从其他各种方式吧，大家可以说是想尽了各种方法。那么今天就给大家分享一个新型的，正在兴起并且不断扩大规模的养猪模式，也就是大棚养殖。使用大棚养猪很自然的一点就是成本降低 ，毕竟大家心里也清楚，如果修建一个猪圈的话，用到的水泥、砖块都是不便宜的，而换成大棚就好多了，无非就是一些木条加上一些塑料薄膜构成，更好一点的话有人会想着坚固问题，就给木条换成铁的，或者是不锈钢的。但是不怎么计算，这种方法都是比较划算的，成本更低一点的。空气好也是大棚的另一大特色，用过大棚的猪友应该明白，他是上边有塑料，而四周的话并没有东西遮挡的，所以说如果是在夏季就可以通过足够的通风来给猪舍降温，减少中暑。同时，通风好也就间接的改善了猪圈的环境，细菌不容易滋生，慢慢的疾病也少了。
其次选好仔猪宜选吃得多，长得快，尾巴粗而短的猪，可以节省饲料20%以上。养杂种猪喂养杂种一代猪日增重可提高30%，节约饲料40%，发病率降低60%～80%。及时去势给公母猪及时去势后再喂养，可以缩短喂养育肥期20天左右，节省饲料15%。
最后在养猪生产中，饲料费用约占产品成本的60%-70%。因此，节约精料.降低饲料费用，就成了养猪获得最大经营利润的关键。这里所说的节约饲料，决非单纯地减少喂量，而是以猪的营养据要为基础，从提高饲料的营养价值和饲料的转化效率入手。一般根据肉猪在不同生长阶段对营养的需要，配制成几种配合饲料或混合梢料。 使用混合精料时，必须科学地搭配精、青、粗的比例，促进肉猪快长快大。在农村养猪生产中，应当重视合理利用优质的青、粗饲料。以节约精料的消耗量。
养猪技术培训班
你的这个问题有点太模糊，其实现在每个地方的县级以上主管农业部门都有培训班，他们那个培训班包含的还挺多的，教你怎样把猪养好，怎么销售出去，等等一系列养殖的培训，你可以去问问或者拨打12316电话咨询
养猪技术知识
要想把猪养好不是件容易的事，最起码以下这几点都必须要掌握：
要创造良好的养猪条件
要使猪健康、快速生长，投入和产出比例高，就要为猪创造良好的生长条件，具体说来就是做到“四良”，即“良种、良料、良舍、良管”。
1、良种：我国地域辽阔，地理、气候条件差异很大，猪的地方品种繁多，多达数十个。我们在具体选苗时，要挑选个大、脚高，体格匀称，用手触摸耳根无发热，身上无红点，无拉稀，采食正常的健康猪。
2、良料：要养好猪，我们应搞清猪的营养需要及其功能，同时还要学会识别真假、好坏的饲料，为养猪准备新鲜、营养全面的优质饲料。
3、良舍：猪栏的建设，要选在相对地高一处，以便于排水排便。同时要考虑透光透气，防暑避寒。猪栏的大小按1头猪占地1.2平方米计算，食槽长度按每头40厘米设计。地平按拉便一秀低，其他三角较高保持一定斜度辅面。这样便于打扫卫生和冲选干净。
4、良管：建好栏、选好苗，准备好优质饲料后，就要进行优良的管理。一是三角管理，调教猪吃在一处，睡在一处，拉在一处；二是勤打扫卫生；三是准确供料；四是注意观察猪只是否生病；五是定期驱虫和防疫。
要改进喂养方法：
要使育肥猪健康、快速生长，除了要做到以上“四良”外，在喂养方法上还要进行“四改”，即熟改生喂，稀改干湿喂，单一饲料改混合喂，随意喂养改定时定量喂。
1、熟改生喂：传统的饲料方法是把饲料煮熟喂猪，饲料在煮熟的过程中，其高温会破坏一部分营养成份，特别是维生素大部分被损失掉了。饲料生喂，既保证营养成分不被破坏，又能节省人力和燃料，还可防止亚硝酸盐中毒。除马铃薯、芋头、南瓜、木薯含淀粉高的饲料煮熟喂有利消化外，其他饲料均可生喂。
2、稀改干湿喂：养猪有干喂、稀喂和干湿喂法。干喂需很多唾液和胃液浸湿饲料，干粉也容易引起咽喉炎和使猪呛鼻；稀喂看起猪吃得很饱，但长势却很差。因为一是水多了冲淡胃液不利于消化；二是水太多增加内脏负担，排泄快，排泄量大，影响饲料消化吸收；三是水多营养不够，不能准确掌握喂量。干湿喂法，浓度一般像粥一样，喂料后胃液能很好起到分解作用，促进饲料的消化、吸收，使猪生长快，报酬高。
3、单一饲料改混合喂：传统的喂法是有米糠喂米糠，有红薯喂红薯，有玉米喂玉米，有什么就喂什么的单一喂养。单一喂养法营养不全面，猪长势慢，饲料利用低。改为混合喂养。既充分利用己有的饲料，又补充一些其他饲料，营养全面了猪就会快速生长，饲料的报酬高了，也才能养出效益。
4、随意喂养改定时定量：传统的喂养方法是什么时候有空什么时候喂猪，什么时候想喂就什么时候去喂。改为定时后，使猪产生良好的条件反射利于生长，定量后减少浪费又保证营养促进快速生长。
三，要掌握疾病防疫与治疗方面的知识
1，畜牧学：最基础的知识要必备，没有深的研究起码要了解部分毛皮，边养殖边学习。
2，家畜环境生理学：要了解不同猪种的生活习性，对环境的要求，生理特点等，这个更专业。
3，营养学：怎么吃？怎么喝？才能不生病长得快，而且还节省饲料，这个应该是养猪比较关心的话题，所以说这方面的知识要必备。
4，疾病的防治与治理：既然养猪，猪生病这个就是逃不开的话题，如果有专业的兽医团队还好，管理者只需要大致了解就行。
5，生物药品：平时的疾病预防，生病后药品的选择也是一个学问，价格低效果好这个也是需要掌握的。
6，兽医免疫学：现在养猪对疫苗的依赖度越来越高，为了防止疾病的发生这个也是必备的知识。
7，家畜解剖学：是不是越来越专业了？如果有猪生病死亡，找不到原因有时候还需要解剖找答案，这个情况一般很少能用到，如果真的大量死亡那就要找专业人士了。
很多人觉得做好一消毒二防疫三治疗就可以了，其实疾病只是养好猪的一个方面，管理，经营，选种，营养，环境也很重要。养猪看起来简单其实也是一门大学问，不是三言两语能够说明白的，边养边学边总结！
图片来源于网络！
养猪技术教程大全
首先要学养殖技术，下面我们来看一下科学养猪。
自然养猪法技术要点1．一定不要把带有传染病的猪带进圈内，应着重自繁自养，如确需购入仔猪，需从同一来源的经畜牧主管部门核准的养猪场引进仔猪，按程序经免疫后再放在圈内饲养。随意从集市上购买仔猪，很可能导致失败。2．猪场进猪后进行封闭管理，严禁参观，本场人员出入圈舍也应遵守消毒规则，场内外工具、人员衣、鞋、靴、帽不得交叉使用。3．自动食槽必须规范，随着猪采食而随时漏料。4．自然养猪法省工、省力，但不能放任不管，要随时观察猪群状况、饮水器漏水状况、自动食槽状况、地面干湿状况等，发现异常要及时调整和处理。5．所用垫料一定要新鲜、清洁、干燥，经铡碎垫到圈内，厚度应不少于40厘米，应尽量多掺些锯末，因锯末松散性大。6．自然养猪法在冬季运作非常顺利，而夏天要进行防暑。猪场周围要栽植树木或速生爬蔓瓜菜类，以调节气温。气温达30℃以上时，每天下午要利用喷淋器进行喷淋，每平方米一个喷头，每半小时一次，每次两分钟。7．搞好饲料配合，保证充足营养，一般生长育肥猪的饲料配方是：玉米（或大麦、高梁、次粉等）60％、豆粕18％、麸皮15％、预混料5％、其它2％，其营养水平每千克日粮约含消化能12兆焦，粗蛋白16％，赖氨酸0.8％以上，料肉比3∶1，平均日增重700克，育肥猪达95kg体重需90天左右。8．挑选并饲养二元或三元杂种猪，杂种猪生活力强，省饲料，生长快，患病少。9．在猪场出猪口建设出猪台，以减轻劳动强度并确保猪体健康。养猪快速育肥必须把准八个关键性的技术要点：?消好毒入栏前，除搞好栏舍的防寒、隔热、通风透气、采光、排水、防潮、打扫卫生、清除粪便杂物外，重点要用20％的石灰水混悬液或用20％的漂白粉液彻底对栏舍进行消毒。选好苗选购仔猪填栏，从品种上要挑选二元杂交猪或挑选最理想的“杜长大”三元杂交瘦肉型仔猪；从群体上要选择体重达标、大小均匀的仔猪；从个体上要选购“嘴深四脚齐，稀毛显白皮，一身圆滚滚，吃食把脚移”的健壮、活泼、肯长的小猪。配方要根据猪的不同阶段生长的营养要求进行饲料配方，20―35公斤，每公斤饲料含消化能3100―3200千卡；粗蛋白质17―18％；35―60公斤，每公斤饲料含消化能2900―3000千卡，粗蛋白质14―15％；60―90公斤，每公斤饲料的消化能2900―3000千卡，粗蛋白质13―14％。驱好虫生猪经常接触地面，加上喂生料，易感染寄生虫，影响猪的发育、增重，严重的还会造成死亡。故对购进的仔猪必须进行体内驱虫。驱虫药可选用盐酸左旋咪唑，按每公斤体重用量8毫克，或用敌百虫片，按每公斤体重用量0.1克，混入饲料中喂服，药物剂量一定要准确，以防中毒。健好胃当猪驱虫后，每头小猪用苏打片10克，早晨拌入饲料中喂服洗胃，过两天再每头小猪喂5克大黄苏打片健胃。打好针当猪进栏后，观察7天无病，第一次给猪注射猪瘟疫苗，同时给猪口服仔猪副伤寒苗。再过7天，如猪无毛病，又给猪第二次注射猪丹毒、猪肺疫二联苗。再过7天，如猪无反应，再给猪第三次注射猪链球菌苗。疫苗的注射与口服严格按标签上说明操作。去好势?用作育肥的公母猪均需适时阉割。小猪阉割后，性情变得温顺，促进食欲，提高增重速度，改善肉的品质。小公猪一般应在出现雄性特征(如爬跨)前，进行旺食期阉割。小母猪应在性成熟后，即第一个发情期后阉割。适时出好栏?猪养到100公斤以上还不出栏是不经济的。从猪的发育规律来看，前期生长快，日增重达到高峰。高峰期后，增重下降，继而生长缓慢，甚至停滞。当肥育猪体重超过100公斤时，不仅饲料报酬降低，维持生存所需要的能量大大增加。一般说来，生猪活重达到100公斤左右屠宰最适宜，屠宰率可达75％，净肉率66％，经济效益较好。怎样养猪才能确保饲养安全实行生产区封闭式管理。封闭式管理可以控制外源性传染病的传染，生产区与生活区严格隔开，生产区不得饲养任何动物，生肉带入生产区，并谢绝一切参观活动。特别要严禁猪贩子、屠宰手入内。进入生产区的饲养人员要更换工作服，鞋、帽（工作服、鞋、帽不得穿出猪场），经紫外线灯消毒和消毒池液消毒后，方可进入生产区。场外运输车辆、用具、饲料包装不能进入生产区，以防止带病入场。猪场应采用自来水或井水，不可用塘水。因农村有些养猪户喜欢将病死的猪只丢弃在河塘中，使污染水成为传染媒介。从饭店、宾馆、酒店收集来的泔水，要经过煮沸消毒后饲喂。加强免疫工作。引进种猪，应从非疫区引进，并索要检疫证。新引进的种猪，要场外隔离观察15天，补打防疫针，确认健康无病后方可进入生产区进行饲养。严格卫生消毒制度。搞好舍内外环境卫生，做好灭鼠、驱除蚊蝇和定期驱虫工作。注射和用具每日消毒1次，春季进行1次彻底的清扫和消毒。猪舍、地面、墙壁、料槽要选用2%的烧碱消毒（消毒后的饲饮用具再用前要用清水冲洗）；也可用10%的草木灰水、20%的生石灰乳等消毒。车辆、用具可选用5%的过氧乙酸消毒。每圈猪出栏后，要进行1次彻底消毒，并空圈1周后方可进猪。消毒池中消毒液为3%的来苏儿，每周更换1次。建立严密的合理免疫程序。出产母猪配种前1~2周接种细小病毒疫苗，每年的4~5月间蚊虫未出现前进行1次猪乙型脑炎疫苗接种。怀孕1个月的母猪和产前30天的母猪各注射1次大肠杆菌病疫苗。仔猪35日龄，分别注射伤寒、猪瘟疫苗。仔猪70日龄，注射猪瘟、猪丹毒二联苗或猪瘟、猪丹毒、猪肺疫三联苗。仔猪断奶后1周，对母猪注射猪瘟、猪丹毒、猪肺疫三联苗。
养猪技术与经营管理
养殖化粪池建造标准
1、猪场的选址
选地。养猪场在选择养猪用地时要注意土地的的性质，不能选择用基本农田，并且要对该地块及周围地块今后的开发方向有所了解，避免所选地块与政府其他开发项日相冲突。
地势。养猪场要求地势高燥，场地的高度至少要在历史洪水的水平线以上，地下水位在2m以下，地势要求平坦但具有一定的缓坡，但是坡度不宜达大，不应超过20度，以便于排水排污。可避免地面潮湿，利于猪体的热调节及肢蹄的发育，可避免病原微生物和寄生虫的侵袭。养猪场要求背风向阳，通风良好，这样可通过自然通风保持圈舍的温度及相对湿度，防止舍内有害气体大量的积滞。
周边环境。还要求根据养猪场的经营方式、生产特点、饲养管理特点等选择场址，要求猪场要距离铁路、公路、城镇、居民区以及其他公共场所1000m以上，并且要位于居民区的下风向或者侧风向；距离屠宰厂、畜产品加工厂、垃圾场以及污水处理场、旅游区2000m以上，周围3000m没有大型化T厂或者其他畜牧污染源。养猪场周边的交通要方便，供电要求电压稳定，少停电。
水质和供水量。养猪场用水量大，尤其是日前养猪场多为规模化养殖，每天的需水量都非常多，如果水源不足会严重影响猪场的正常生产，凶此猪场的选址还要注意水源是否充足。同时还要注意水质，要求水质要符合无公害畜禽饮用水标准要求，水中的细菌含量不可超标，水中的重金属含量也不可过高，凶此在建猪场前还要到相关的机构检测该场地的地下水水量和水质是否达到标准。
排污。猪场排污一直以来都是较难解决的问题，尤其是规模化猪场，日产粪污量大，并且污水的日产量也因清粪方式的不同而不同，所以在建场时要确定好污水处理场的位置，一般污水处理区应该设计在猪场地形以及风向的下游，这样便于排污，并且可以保证猪场生产区和生活区的空气质量。另外，在选址时，猪场的周围最好有较大面积的农田、果园等，这样可以将粪水处理后当作肥料使用，不但可以利于粪水的处理，还可促进当地农业发展。
猪场的建场面积要地势地形以及养殖规模来定，猪场的生产区的总建筑面积要按年出栏一头生猪需0.7～1lT12来计算，其他区域则要根据实际的规模大小来确定，在计算占地面积时要将生产区、管理区、生活区等都考虑进去，还要留有一定的余地。
2、猪场的布局
日前规模化生猪养殖场各功能区的细分布局影响着猪场建设投资、经营管理、组织生产、劳动效率、疫病防控，同时还影响着猪场的小气候条件，从而影响着养殖经济效益。凶此在定好场址后就要对其进行科学的分区规划与布局。养猪场可分为三个功能区，即生产区、管理区和病畜管理区。生产区又分为猪舍、料库等；管理区包括与经营管理相关的建筑物以及职工的生活福利建筑物与设施等；病畜管理区包括兽医室、隔离舍等。在划分各区时要综合的考虑，既做到利于执行卫生防疫制度和措施，又做到使生产达到有机的联系，凶此要根据风向和地势去场区进行划分。
生产区的猪舍根据种猪群、仔猪群和育肥猪群进行分区，各群要在不同的地段分区饲养，其中种猪群和仔猪群应设置在防疫较好的地方，不同猪群间要保持100～200m的卫生间距，种猪舍还细分为妊娠母猪舍、哺乳母猪舍、空怀母猪舍。种猪舍要与其他猪舍隔开，并且要设置在人流较少和猪场的上风向，与公猪舍保持一定的距离，防止母猪的气味对公猪形成不良的刺激。分娩舍要与妊娠舍与保育舍接近，育肥舍则应在生产区的下风向，并且要与出猪台较近；生产区饲料料库的设置要在不需要外来运料车辆进入的前提下，还要方便饲料的运进与运出，同时还要与猪舍保持最短且最方便的距离，还应设置在猪场地势的高燥处。
管理区凶与外界的联系较为紧密，凶此要与交通线、销售点、电路、水源以及饲料供应地的距离较近，管理区应设置在场区内的上风口，并且场外运输与场内运输的车辆要严格的分开。另外，管理区还包括办公室、食堂和宿舍，这些地方应该独立设置。
病畜管理区，包括兽医室、隔离舍等，为了防止疫病的传播与，该区应设在生产区的下风向和地势较低的地方，并与猪舍的卫生距离保持在300m。病畜隔离区要与外界隔绝，要设置有单独的通道和出人口，与其他猪舍的距离保持在300～500m。病死猪的无害化处理地也要与猪舍保持300～500m的距离，并且要严密的隔离。
猪场的四周要开有防疫沟，还要做好绿化T作，不但可以美化环境、净化空气，利于防疫，还可以改善猪场的小气候，起到防暑、防寒的作用，另外，还可以减弱噪声污染，提高养殖经济效益，凶此在对场区进行布局时不可忽略绿化的重要性。
养猪技术与猪病防治
抗原和相应的抗体在动物体内或体外都能发生特异性结合反应，这种反应称为抗原抗体反应，习惯上把体内的抗原抗体反应称为免疫反应，体外的抗原抗体反应称为血清学反应，因为抗体主要存在于血清中。血清学反应可以用已知的抗体检查未知的抗原，也可用已知抗原测定未知的抗体。人们根据抗体能与相应抗原发生反应并出现可见的抗原—抗体复合物的原理，设计了许多血清学诊断方法，不仅可以检测动物体内乃至体外的病原微生物，或其抗原性成分，而且还可以测定动物机体对病原微生物的侵袭或对其抗原成分的免疫反应。在抗原—抗体复合物成不可见状态时，可以通过琼脂扩散、凝集实验以及酶标记等指示系统，使其变为可见或可测状态。目前已知的血清学诊断方法很多，现仅介绍几种在目前条件下规模化猪场通过学习都能做到的诊断方法：（1）凝集试验猪病诊断过程中常用的操作方法有以下几种：①全血平板凝集试验实践中主要用于细菌性疾病的抗体检测和抗原（经分离培养后）的鉴定。现举例用已知猪丹毒抗原（丹毒杆菌的纯培养液）测定被检猪血清中的抗体。其操作步骤如下：a.材料猪丹毒凝集抗原，玻片，9号针头，酒精棉球，酒精灯，铂耳（取血环）等。b.操作用铂耳取已知抗原1滴，置于玻片上。用酒精棉球擦拭针头，铂耳在酒精灯上灼烧消毒。用针头刺破被检猪的耳静脉，以铂耳取血与玻片上的抗原等量混合，在2～3分钟内观察结果。c.结果判定出现颗粒状的凝集，为阳性反应。否则为阴性。②试管凝集试验是一种定量法，用于测定被检血清或其他体液中有否某种抗体及其效价，可做临床的辅助诊断，或用于流行病学监测。在猪场中，本法常用于猪布氏杆菌病的诊断。A.材料布氏杆菌病试管凝集抗原（1∶20倍稀释），布氏杆菌病阳性血清、阴性血清（1∶25倍稀释），稀释液（0.5 %石炭酸生理盐水），灭菌小试管，1毫升吸管，试管架，待检血清等。B.操作取试管7支置于试管架上，设阳性和阴性血清及抗原对照各1支，测定管4支，以后每增加1个样品，只需增加4支测定管。按表10示意稀释血清，加抗原，完成后每支试管内应含1毫升液体。表10 布氏杆菌试管凝集反应（单位：毫升）试管号 1 2 3 4 5 6 7血清稀释倍数 1∶25 1∶50 1∶100 1∶200 阳性血清对照1∶25 阴性血清对照1∶25 抗原对照0.5%石炭酸生理盐水 1.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5待检血清 0.5 0.5 0.5 0.5 抗原（1∶20稀释） 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5弃0.5 弃0.5加入抗原后，将试管充分振荡，置于37℃温箱反应24小时后，判定结果。C.判定标准“-” 液体均匀混浊，管底无凝集物，不凝集。“+” 液体透明度较差，管底有少量凝集物，为25%凝集。“++” 液体中等浑浊，管底有中等量的伞状沉淀，50%菌体凝集。“+++” 液体几乎透明，管底有明显伞状沉淀，75%菌体凝集。“++++” 液体完全透明，管底出现大片的伞状沉淀，100%菌体凝集。结果判定：已出现50%菌体凝集的血清最高稀释度为该血清的凝集价。在检测猪布氏杆菌病时，血清凝集价在1∶50以上时，可判为阳性反应。若凝集价为1∶25，则为可凝集（需重复试验1次）。如猪群中基本无阳性反应。则凝集价1∶25也可判为阴性。③间接红细胞凝集实验（简称间接血凝试验）该试验能大大提高反应的敏感性。用抗体致敏红细胞检测相应的抗原，称为反向间接血凝试验；反之，称为正向间接血凝实验。在猪病的诊断中，常采用本法对猪口蹄疫、水泡病、猪瘟、传染性胸膜肺炎等疾病抗原的鉴定，或抗体的检测。现举例猪口蹄疫的抗体检测（正向间接血凝），操作步骤如下：A.目的检测被检血清样品中猪口蹄疫抗体的效价。B.材料猪口蹄疫（O型）正向间接血凝标准致敏红细胞（由兰州兽医研究所提供），标准阳性阴性血清，稀释液，96孔“V”形有机玻璃微量血凝板，微量加样器，滴头，被检血清等。C.操作将待检血清置60℃水浴中灭活30分钟，用微量加样器对血凝板上的每孔加入25微升稀释液，取25微升待检血清加到第一孔，用加样器以吸入与排出的动作混合3～4次，取出25微升放入第二孔混匀，依次到第九孔，取出25微升弃掉。血清稀释度从第一到第九孔分别为1∶2，1∶4，1∶8，1∶16，1∶32，1∶64，1∶128，1∶256，1∶512（第一排的10～12孔设阳性血清对照、阴性血清对照和抗原对照）。每孔加入25微升致敏红细胞，振荡1～2分钟，置37℃温箱或室1～2小时或更长时间，然后判定结果。D.判定标准“-” 红细胞沉底，呈圆点状，不凝集。“+” 红细胞大部分集中于中央，周围只有少数凝集，即25%凝集。“++” 红细胞呈薄层凝集，中心致密，边缘分散，即50%凝集。“+++” 红细胞凝集程度较上有所增加，即75%凝集。“++++” 红细胞呈薄层凝集，布满整个孔底或边缘，蜷曲呈荷包蛋边状，即100%凝集。结果判定：以出现50%凝集（++）的血清最高稀释度，为该血清的间接血凝价。④血凝（HA）与血凝抑制（HI）试验在猪的传染病中，细小病毒感染、乙型脑炎、伪狂犬病等，适宜进行血凝和血抑试验，本试验以检测猪细小病毒血清抗体为例，介绍如下：A.材料猪细小病毒浓缩诊断抗原，豚鼠沉积红细胞配成的0.5%悬液。稀释液、标准阳性和阴性血清、被检血清、96孔V形有机玻璃微量血凝板、25～50微升微量移液管、微量振荡器、普通离心机等。B.试验方法a.血凝（HA）试验用滴管在96孔血凝板上以第一孔至试验所需要稀释倍数孔，每孔滴加稀释液25微升，用移液器从第一孔开始依次稀释，置微量振荡器上振荡15秒，最后每孔滴加0.5%豚鼠红细胞25微升，振荡30分钟，置室温（20℃左右）1小时后判定。b.血凝抑制（HI）试验被检猪血清先经56℃、30分钟灭活，然后加入50%豚鼠红细胞（最终浓度）和等量的高岭土，摇匀后放室温15分钟，经2000转/分离心10分钟，取上清液以除掉血清中非特异性的凝集素和抑制素，然后用稀释液将每份处理过的血清1∶5～1∶10至240倍比稀释，在向每孔加入等量4个血凝单位的标准血凝素（抗原），混匀后置室温1小时，加入新配制的0.5%豚鼠红细胞悬液，混匀后置室温2小时，判定结果，同时设阳性、阴性血清及红细胞和抗原的对照，HI抗体滴度≥1∶20者为阳性，猪感染PPV后7天左右可检出HI抗体，12～14天可达1∶1024～5000。⑤乳胶凝集试验（LAT）本法在猪病中主要作用于伪狂犬病和猪萎缩性鼻炎的诊断，是用其病毒或细菌致敏乳胶抗原来检测被检猪的血清、全血或乳汁中的抗体，具有简便、快速、特异、敏感的优点。A.材料伪狂犬病毒致敏乳胶抗原，伪狂犬病阳性血清、阴性血清、稀释液，玻片，吸头，被检血清或全血或乳汁（通常采初乳，经3000转/分钟离心，取上清液做待检样品）。B.试验方法a.定性试验取被测样品（血清，全血或乳汁）、阳性血清、阴性血清、稀释液各1滴，分置于玻片上，各加乳胶抗原1滴，用牙签混匀，搅拌并摇动1～2分钟，于3～5分钟内观察结果。b.定量试验先将血清在微量反应板或小试管内作连续倍比稀释，各取1滴依次滴加于乳胶凝集反应板上，另设对照（同上），随后各加乳胶抗原1滴。如上搅拌并摇动，然后判定。C.结果判定首先对照组要出现如下结果，本试验才能成立：阳性血清加抗原呈“++++”，阴性血清加抗原呈“-”，抗原加稀释液呈“-”。“++++”全部乳胶凝集，颗粒聚集于液滴边缘，液体完全透明。“+++”大部分乳胶凝集，但颗粒明显，液体稍混浊。“++”约50%乳胶凝集，但颗粒较细，液体较混浊。“+”仅有少许凝集，液体混浊。“-”液滴呈原有的均匀乳状。以出现“++”以上凝集者，判为阳性凝集。注意事项：试剂盒应在2～8℃冷暗处保存，暂定1年。乳胶抗原为乳白色状液体，如出现分层，使用前轻轻摇匀。（2）沉淀实验具体方法有多种，如环状沉淀实验、琼脂扩散实验和免疫电泳等。在猪病的诊断中，目前最常用的是琼脂扩散实验，现以检测伪狂犬病的抗体为例，将其操作方法介绍如下：A.材料伪狂犬病标准抗原，阳性血清，阴性血清，待检血清（56℃灭能30分钟），生理盐水，打孔器，微量移液器，培养皿，琼扩琼脂（配制方法：含有0.1%石炭酸的磷酸缓冲盐水，加入1%的优质琼脂，在沸水中融化均匀，若有杂质，须用纱布过滤，然后分装于盐水瓶内，保存备用）。B.操作a.浇琼脂板和打孔将已融化的琼脂趁热倒入平皿，制成3毫米厚的琼脂板，待凝固后进行打孔。一组共7个孔，中间1孔，孔径4毫米，孔距3毫米。用打孔器打孔，剔出孔内的琼脂然后将琼脂板在酒精灯上来回过2～3次，使琼脂与玻板之间的空隙封闭。b.向孔内加样中央孔加抗原，外周孔第1，5孔加阳性和阴性血清作对照，第2，3，4，6孔加待检血清。将加完样的琼脂平皿加上盖子，置37℃恒温箱扩散24～36个小时，然后判定结果。C.结果判定首先检查标准阳性血清孔和抗原孔之间是否出现明显的致密的白色沉淀线，而阴性孔则不出现，只有在对照组出现正确结果的前提下，被检孔才可参照标准判定。注意事项：第一，琼扩所用的琼脂必须是优质的琼脂粉，若用普通的琼脂条，应事先净化精制。精制的简易方法是：取条状琼脂24克，加蒸馏水1000毫升，在沸水中融化，趁热倒入搪瓷盘中，待冷却后切成1平方厘米大小的琼脂块，用蒸馏水或无离子水浸泡2～3天，每天换水4～5次，然后将处理好的琼脂块隔水融化，加入0.1%石炭酸磷酸缓冲盐水，配成1%琼脂。第二，制备琼脂板应在水平台上进行，防止薄厚不匀。板的厚度要求一致（7.5厘米的平皿，用15毫升琼脂液）。浇制时防止产生气泡。平皿浇制的琼脂板在4℃冰箱内可保存15天。第三，打孔的孔径、孔距力求准确、合适。第四，孔中滴加抗原和血清时，孔内必须加满而又不能外溢。加样时不能带进小气泡。（3）酶联免疫吸附试验（ELISA）它是根据抗原与抗体特异性结合的功能，以酶做标记物，利用酶对底物具有高效催化作用的原理而设计的。它既可以用于抗原的诊断，也可进行血清抗体的检测，可达到定性和定量的目的。已广泛地用于传染性疾病的诊断，血清流行病学调查和抗体水平的评价等。目前在兽医防治的研究和实践中，对于猪瘟、伪狂犬病、繁殖障碍与呼吸综合征、流行性腹泻、旋毛虫病、猪气喘病等疾病，均采用免疫酶技术进行病原诊断、抗体检测和血清学流行性调查，并且已成为规模化猪场化验室工作的一项重要内容。利用免疫酶技术测定抗原和抗体的方法很多，下面简要介绍3种适合猪场使用的免疫酶技术。①斑点酶联免疫吸附实验（Dot—ELISA）A.材料硝酸纤维滤膜（孔径0.45微米），0.01摩/升、pH7.2的磷酸盐缓冲盐水，封闭液（磷酸盐缓冲盐水加入10%马血清或0.1%明胶），30%双氧水（H2O2），3，3′-二甲基联苯胺（DAB）抗原液，阴性对照，待检液，待检血清，阳性血清及阴性血清，酶标兔抗猪免疫球蛋白G（IgG），0.05摩/升三羟甲氨基甲烷—盐酸缓冲液，洗涤液（磷酸盐缓冲盐水加入0.05%吐温-20）。B.检测抗原操作第一，硝酸纤维薄膜（NCM）的处理：在滤膜上划6毫米×6毫米的方格，在方格中央用蘸水笔末端压成圆形痕迹。置于蒸馏水中浸泡10分钟，取出后晾干备用。第二，点样：取1毫升待检液在硝酸纤维滤膜圆圈内点样，同时设立阳性与阴性对照，自然干燥或置于37℃温箱中干燥。第三，封闭：将硝酸纤维滤膜置于封闭液中，37℃、30分钟，用洗涤液洗涤1次，约3分钟。第四，加猪阳性血清，将硝酸纤维薄膜置于猪阳性血清中，37℃作用1小时，取出用洗涤液洗涤3次，每次3分钟。第五，加酶标兔抗猪免疫球蛋白G，37℃作用1小时，然后洗涤3～4次，每次3分钟。第六，加底物溶液（0.05摩/升三羟甲氨基甲烷—盐酸缓冲液100毫升，加3，3′-二甲基联苯胺40毫克，30%双氧水50微升），作用5～10分钟。第七，终止显色，将硝酸纤维滤膜置于蒸馏水中冲洗2～3分钟。第八，自然干燥，或37℃下干燥。第九，判定标准：“-” 不呈现斑点，与阴性对照相同。“+” 斑点较弱或沉淀内有不均质的棕色点。“++” 斑点浅棕色，对比度清晰。“+++” 介于++和+++两者之间。“++++”斑点深棕色，背景白色。出现阳性反应的血清最高稀释度为该血清的Dot—ELISA效价。第十，注意事项：试验中的点样抗原、血清及酶标抗体的稀释度，应根据预备试验确定；试验中应使用不溶性供氢体；如3，3′-二甲基联苯胺，4-氯-1-萘酚等，不能使用可溶性供氢体；根据试验的目的要求，确定检测抗原或抗体；封闭液可使用异种动物血清、牛血清蛋白（BSA）或明胶溶液等进行封闭，根据预备试验选择最佳封闭条件。C.检测抗体操作第一，硝酸纤维滤膜的处理，同检测抗原。第二，点样，取已知抗原液点样，自然晾干或37℃干燥。第三，封闭，同检测抗原。第四，将点样后的硝酸纤维滤膜按点样格子剪成小块，置入系列稀释液的待检血清（1∶10，1∶50，1∶100，1∶200，1∶400，1∶800，1∶1600，1∶3200，1∶6400，1∶12800）中，同时设立阳性和阴性血清对照，37℃作用1小时，然后用洗涤液洗涤3次，每次3分钟。第五，以下均同检测抗原第第第第第十项操作。②酶联免疫吸附实验（ELISA）现介绍猪病诊断常用的两种方法：A.间接法将已知抗原吸附（或称包被）与固相载体，孵育后洗去未吸附的抗原，随后加入含有特异性抗体的被检血清，感作后洗涤未起反应的物质，加入酶标抗同种球蛋白（如被检血清是猪血清，则需用抗猪球蛋白），感作后再经洗涤，加入酶底物，底物分解后出现颜色变化，颜色变化的速度及程度，与样品中的抗体量有关，即样品中的抗体愈多，颜色出现愈快、愈深。a.材料0.05摩/升、pH9.6碳酸盐缓冲液，稀释液用0.01摩/升、pH7.2磷酸缓冲盐水（含0.13摩/升氯化钠，0.5%犊牛血清），洗涤液用0.01摩/升、pH7.2磷酸盐缓冲盐水（含0.13摩/升氯化钠，0.05%吐温-20），30%双氧水，邻苯二胺（OPD），pH5.0磷酸二氢钠—柠檬酸缓冲液，2摩/升硫酸，抗原，阳性血清，阴性血清，待检血清，酶标兔抗猪免疫球蛋白，40孔聚苯乙烯联板，酶联免疫检测仪。b.操作第一，用碳酸盐缓冲液配置一定浓度的抗原包被液包被酶联板，每孔100微升，置37℃条件下2小时，或在4℃冰箱内过夜。第二，倾去孔内液体，用洗涤液加满各孔，洗涤3次，每次3分钟，然后倾尽洗涤液。第三，除调零孔外，其余孔加入用稀释液稀释的待检血清，每孔100微升，同时设立阳性、阴性血清对照，置37℃下反应1.5小时。第四，抗体效价测定。将待检血清进行血清进行倍比稀释，每份血清加两排孔，即同一稀释度的血清加上下相邻的两个孔，每孔100微升，凋零孔不加血清。同时设立阳性、阴性血清对照。置37℃反应1.5小时。第五，洗涤同第二。第六，除调零孔外，每孔加入酶标记兔抗猪免疫球蛋白G 100微升，置37℃下反应1.5小时。第七，洗涤同第二。第八，每孔加入新配置的底物溶液（取邻苯二胺40毫克，溶于100毫升pH5.0的磷酸盐—柠檬酸缓冲液，临用前加入30%双氧水0.15毫升）100微升，室温下观察显色（5～30分钟）。第九，每孔加入50微升，2摩尔/升硫酸终止反应。第十，用酶联免疫检测仪测定每孔490纳米波长的光密度（OD）值。B.夹心法本法是检测抗原的方法，将特异性免疫球蛋白吸附于固相载体表面，然后加入含有抗原的溶液，使抗原和抗体在固相表面形成复合物，洗除多余的抗原，再加入酶标记的特异性抗体，感作后冲洗，加入酶的底物，颜色的改变与被测样品中的抗原量成正比。a.材料同间接法。b.操作（以检测猪瘟病毒抗原为例）第一，抗体包被：将一定溶度的猪瘟高免血清（用碳酸盐缓冲液进行稀释）包被酶联板，每孔100微升，置37℃下反应2小时，或4℃冰箱中过夜。第二，洗涤：同间接法。第三，加被检样品，除调零孔外，每份样品加2个孔，每孔加100微升，同时设立阳性抗原、阴性抗原对照，酶结合物对照（抗体加磷酸盐缓冲盐水加酶结合物），置37℃下反应1.5～2小时。第四，洗涤，同第二。第五，加底物溶液，同间接法第八。第六，同间接法第九。第七，同间接法第十。C.结果判定常用的判定方法有3种。阴阳性表示法：待检样本吸收值：规定吸收值≥0.2～0.4为阳性。规定吸收值等于阴性样本平均吸收值加SD（标准差）。阳性阴性比（P/N）法：样本吸收值/阴性样本平均吸收值≥2～3者为阳性。终点表示法：以出现阳性反应的样本最高稀释度，为该样本的滴度。D.注意事项第一，包被过程中以高pH和低离子强度的条件为佳，包被浓度在1～100毫克/毫升选择最佳浓度。第二，血清或抗原稀释液应含5%～10%异种动物血清，或1%牛血清白蛋白，或0.5%明胶，以起封闭作用，防止非特异性反应，否则应在第二与第三步之间加封闭液进行封闭。第三，洗涤要充分，酶结合物应按照要求进行稀释和使用，底物溶液一定要现配现用。第四，显色时阴性对照刚出现微黄色时，应立即终止反应。第五，用阳性阴性比方法判定结果时，阴性对照孔若小于0.1，则易出现误判。第六，用自动酶联仪检测时，应按仪器规定说明确定调零孔。第七，同一稀释度2个孔的490纳米波长光密度值的平均值，为该稀释度的光密度值，对照孔应作同样处理。③猪瘟单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验A.材料本试验的试剂盒由中国兽药监察所提供。本抗原包括猪瘟弱毒单抗纯化酶联抗原和猪瘟强毒单抗纯化酶联抗原，分别供检测经猪瘟弱毒疫苗免疫后产生的抗体和感染猪瘟强毒后产生的抗体之用。同时提供酶标抗体，阳性、阴性血清，酶联板及其他器材和试剂。B.试验方法第一，用包被液将猪瘟弱毒单抗纯化酶联抗原、猪瘟强毒单抗纯化酶联抗原各做100倍稀释，以100微升分别加入做好标记的酶联板孔中，置湿盒于4℃过夜。第二，弃去孔内液体，用洗涤液冲洗板3次，每次间隔3～5分钟，拍干。第三，用稀释液将待检血清作400倍稀释，每孔加入100微升，同时将猪瘟阳性阴性血清以100倍稀释作对照，37℃下培育1.5～2小时。第四，重复第二步。第五，用稀释液将兔抗猪免疫球蛋白G辣根过氧化物酶结合物作100倍稀释，每孔加入100微升，37℃下培育1.5～2小时。第六，重复第二步。第七，每孔加入底物溶液（每块板所需的底物溶液按邻苯二胺5毫克加底物缓冲液5毫升加30%双氧水18.75微升配制）100微升，室温下观察显色反应（一般阴性对照孔略微显色，立即终止反应，并以阴性孔作空白调零）。第八，每孔加入终止液50微升，于酶联读书仪上测定490纳米波长的光密度（OD）。C.判定标准a.在猪瘟弱毒酶联板上光密度＞0.2为猪瘟弱毒抗体阳性。光密度＜0.2为猪瘟弱毒抗体阴性。b.在猪瘟强毒酶联板上光密度≥0.5为猪瘟强毒抗体阳性。光密度＜0.5为猪瘟强毒抗体阴性。D.注意事项第一，运输单纯纯化酶联抗原时，必须使用冰盒低温运输。第二，配制洗涤液时，应使用新鲜蒸馏水或无离子水；每次洗板后，尽量不使孔中有残余液体，以免影响结果。第三，底物溶液临用前配置，待邻苯二胺完全溶解于底物缓冲液后再加双氧水，混匀后立即加入孔中。第四，终止反应后，应立即读数。200.猪场兽医检验室应配备哪些器材和试剂？（1）设备类：猪场兽医检验室配备的主要设备有电冰箱、电热培养箱、电热干燥箱、台式离心机、超净工作台、高压灭菌锅、显微镜、蒸馏水器、微量血清振荡器、组织捣碎机等。（2）器械类：猪场兽医检验室配备的主要器械有普通天平、研钵、铁三脚架、酒精灯、石棉网、试管架、接种棒、带盖搪瓷盘、铝饭盒、微量反应板（V型）、微量移液器（100微升、250微升）、普通剪刀、眼科剪刀、眼科镊子、长镊子、手术刀等。（3）猪场兽医检验室配备的主要玻璃器材：有玻璃注射器、试管、刻度吸管、烧杯、三角烧瓶、玻璃漏斗、量筒、玻璃珠、载玻片、盖玻片等。（4）试剂类：猪场兽医检验室配备的主要试剂有95%乙醇、氯化钠、氢氧化钠、碱性复红、结晶紫、沙黄、姬姆萨、甲醇、甲醛、草酸铵、甲基红、营养琼脂、麦康凯琼脂、SS琼脂、三糖铁琼脂、微量生化反应管、二甲苯、显微镜油、擦镜纸、常用猪病血清学诊断试剂盒等。附录：猪的实用生理常数
养鹅
养鹅