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虾塘加温设备
我们应用PCR技术,放大EHP的18SrRNA基因,再用标记地可辛的探针探测原位杂交细胞中被感染的EHP,最后开发新的PCR技术探测对虾组织,排泄物和水中的EHP。
2.材料和方法
2.1对虾
2006年在文莱收集了感染对虾肠孢子虫(EHP)的南美兰对虾。2014年和2015年在越南虾塘里收集了感染EHP的南美白对虾。2014年,从泰国运送了一批南美兰对虾到我们亚利桑那大学的实验室进行隔离检测,这些对虾后来被检测出感染了EHP,它们的肝胰腺,排泄物和水进行了PCR技术取样检测。
为了检测原位杂交(ISH),并通过PCR技术分析EHP的特异性,研究人员使用了具有棉虾病临床症状的斑节对虾样本,这些对虾来自2005年(固定组织)和2006年(冰冻组织)的马达加斯加。还使用了感染了鳄组织变形虫的南美白对虾,这些虾是在2014年收集到的。通过PCR技术分析,肝胰腺组织或者整只对虾被保护在95%的酒精当中或被风干后送往我们实验室。通过原位杂交技术,用戴维森固定法将虾固定。
2.2.DNA提取
从感染EHP的对虾中去除肝胰腺,(4-5只虾)放进一个样本中。装运感染EHP的对虾的虾槽中对排泄物和水进行了取样。利用MicrosepAdvance离心装置(PALL公司)将虾槽里的水浓缩150倍,用于DNA提取。用一种高纯度DNA模板制备工具(RocheBioscience)或Maxwell-16Cell LEV DNA纯化试剂盒(Promega)。
为了测试EHP引物的特异性,PCR扩增检测两种寄生虫病中的DNA:
(1)棉虾病,2006年从马达加斯加收集了斑节对虾,这些虾的肌肉变白,通过rRNA基因测序,发现它们的DNA呈阴性,因为内有类似于匹里虫的微孢子虫(GenBankkp825331号);
(2)变形虫病,这些南美白对虾大量死亡,通过组织学检查,最后发现这些虾感染了变形虫(种类不确定)。
为了保证EHP引物没有宿主基因组的反应,制备DNA模板:
(1)来自美国夏威夷的无特定病原(SPF)的南美白对虾(>10样本)、斑节对虾(3个样本);
(2)来自沙特阿拉伯的印度对虾(2个样本);
(3)在新喀里多尼亚养殖的南美兰对虾(2个样本);
(4)来自菲律宾的罗氏沼虾(2个样本);
(5)沙特阿拉伯附近虾塘里采集的蟹(7个样本,未知的物种);
(6)多毛类(3个样本),卤虫生物量(9个样本),鱿鱼(2个样本),磷虾(2个样本),这些是从各种商业供应商运送。
2.3.18S rRNA基因扩增和克隆
PCR检测技术,使用了PuReTaqReady-To-Go珠(GE医疗)。扩增18SrRNA基因的引物18S-F(5’-CACCAGGTTGATTCTGCCTGA)和18S-R(5’-TCTGAAATAGTACGGGCGG)。PCR反应中包含200微米dNTP,0.2微米引物,10mM Tris-HCl(pH9.0),50毫米氯化钾,1.5毫米氯化镁,2.5U Taq DNA聚合酶和1微升提取的DNA(10纳克至100纳克每微升)。放大进行下列循环参数:到达94°C进行初始化3分钟,然后94°C温度下进行30秒,55°C温度下进行30秒,72°C温度下进行1分钟,做35个此循环周期,并在最后一个周期停留在72°C温度下5分钟。在一个含有溴化乙锭的1.2%琼脂糖凝胶中电泳分析PCR产物。在?1KB一带切除和提取DNA,克隆到pGEM-T-easy载体(Promega)上,命名为克隆pEHP-1。通过DNA测序,克隆的插入为1146bp(GenBankNo.kp759285)。国家生物技术信息中心(NCBI)使用BLAST序列数据库对GenBank的相似序列进行了搜索。
2.4、探针标记和原位杂交
克隆pEHP-1质粒DNA被用来做成原位杂交时的一个探针。Mari等人描述,在PCR反应中,使用了digoxigenin-11-dutp(Roche)标记的基因探针(1998)。用于标记反应的引物EHP-F(5’-GGGAACGACGAACGGCTCAG)和EHP-R1(5’-TGCCTTGATGAGACACTGTT)产生一个1.1 kb的片段。digoxigenin标记的DNA探针,用乙醇沉淀,悬浮在水中,并存储在-20°C。棉虾病,感染了类似于匹里虫的微孢子虫的探针如微孢子虫,是从一个克隆的16SRNA基因区域产生。
戴维森的AFA固定虾进行了处理,石蜡包埋,按照标准方法切片(4微米厚)(莱特纳,1996)。经过脱蜡,水化,蛋白酶K消化,和后固定,切片浸泡在用500微升的杂交液中(4×SSC,50%甲酰胺,1×登哈特的溶液,5%硫酸葡聚糖,0.5微克/毫升鲑鱼精DNA),这种杂交液中含有EHP探针含(0.2μg/ml)。切片放在90°C加热表面上10min,然后在42°C温度下进行一夜的杂交。最终采用硝基蓝四氮唑,5-溴-4-磷酸进行检测抗地高辛抗体共轭碱性磷酸酶(罗氏)。
2.5.EHP的PCR检测。
PCR检测技术,使用了PuReTaqReady-To-Go珠(GE医疗)。探测EHP的引物是EHP-510F(5’-GCCTGAGAGATGGCTCCCACGT)和EHP-510R(5’-GCGTACTATCCCCAGAGCCCGA)。放大进行下列循环参数:到达94°C进行初始化3分钟,然后94°C温度下进行30秒,60°C温度下进行30秒,72°C温度下进行30秒,做35个此循环周期,并在最后一个周期停留在72°C温度下5分钟。
3.结论与讨论
3.1临床症状与EHP感染史
目前,养殖对虾过程中所发生的EHP感染还没有特定的的临床症状。EHP感染通常与发育不良和死亡率上升有关。根据越南境内的鱼塘数据(虾农个人提供的数据):把感染后的虾苗放入虾塘后的前25天时间内,对虾生长速度正常,之后,对虾的健康状况开始恶化;受感染的对虾饲料进食量减少(50-70%),肝胰脏变色。对虾受到感染之后,其体型(即重量,每周进行一次称重)仅为健康对虾的10-40%。对虾EHP感染死亡率并非一成不变,根据养殖场统计,对虾每天的死亡率约为1?2%。在实验室测定过程中,对虾EHP死亡率并无显著上升,(Tangprasittipap,2013),由于测定持续周期较短(7天),有可能无法检测出死亡率的大幅变化。情况较为严重的EHP感染可能会增加其他细菌感染的易感性。我们发现,在某些情况下,EHP通常伴有弧菌机会性感染(也称为感染性肝胰腺坏死),这可能会导致增加对虾死亡率。
养虾恒温设备
看需要多高是水温,可以考虑用热泵做恒温,小温差,大流量,这样不会对水池的虾产生影响
虾池加温设备
加注深井冰,利用深井水的温度高,以此来提高池塘的温度。
搭建温棚,利用温棚给池塘内的虾保温,是海南、广东、广西等地的养殖户经常采用的一种加温方式,并且这种温棚成本低、拆装方便。
锅炉+管道+大棚的保温养殖模式,这种一般在江苏、浙江等北方地区的一种养虾模式,具有高经济效益,全年可养殖的特点。
养对虾加温设备
炉虾可以养殖!炉虾就是对虾养殖过程中用锅炉加热供温养出来的对虾!
养殖成功关键点总结:1、温棚养殖,全程扣棚,养殖大环境相对可控。2、全程地下水养殖,避免病毒和细菌的传播。3、增氧能力相对较强,平均2.2W/m3,产量达到2.5~2.9斤/m3。4、锅炉虾苗培苗阶段,平均水温保持在25℃以上,保证了早期的生长速度。5、5月1日之前全部售卖结束,保证了高价位。
池塘加温设备有哪些
需要加温。
泰庞海鲢是海鲢科、海鲢属一种海洋鱼类,适宜温度在20~30°。
其体延长而侧扁,体稍高。眼径较吻长。口稍上位;下颌较突出,上颌向后延长,接近眼后缘。具喉板。体被大而薄的圆鳞,腹部无棱鳞;侧线直走,侧线鳞数36-40。背鳍在体被中央,最后一鳍条延长为丝状;腹鳍起点在背鳍起点下方;臀鳍前半部鳍条较后半部鳍条为长。体背部、青灰色,腹部银白色,吻端青灰色,各鳍淡黄色。背鳍与尾鳍边缘暗。
虾塘加热用什么设备
1、 大棚搭建最重要的就是保温,至少保证最冷时期水温保持在20度以上。整体棚高不要超过3米。搭建大棚时,使用双层棚膜,侧面用彩钢板,可以采用钢架拱形结构,承重力好,便于雨水排除。两个拱门,如果跨度大可以设置成两个拱门, 双拱结构可以增加大棚的稳定性,每个拱门不可超过12米。池子池深2米以上,池塘设计成“w”型,在池底和池边铺上高强度复合防渗膜,早池底部中间放置排污管,便于高密度养殖排污。
2、 放养密度约为每亩12万到15万尾,大棚内密闭,空气交换少,养殖密度大,高密度养殖耗氧量增大,每个大棚需要0.75-1.5千瓦的水车增氧机1到2台,还有微孔增氧机来增加氧气供给。
3、 虾苗长速慢 主要和换水有关,不能天天,换水温度低于20度,水温影响对虾的摄食,并且出现一系列的应激反应,不利于对虾生长。
4、 池塘一次性放满水,看水的蒸发量增加水,换水量一次是5公分到10公分,不应该在早晨、晚上加水,应该在中午,雨天也不行。气温低,影响水温。
5、 补水不是代表不换水,养殖密度大,对虾的排泄物还有饲料残留等肯定会影响水质,如果长时间不更换水肯定会发臭,其实南美对虾对水质要求很高,所以我们要每天排污,和定期补充的有益菌,主要是水中缺少了有益细菌水中有机物的分解就会变慢,有些人就问了有益细菌这么多,主要补充什么有益细菌呢?比如芽孢杆菌、乳酸杆菌,形成有益的细菌菌团,抑制有害菌的繁殖,有益细菌从繁殖到衰减期一般是15天左右,所以养殖户一定要在15天左右及时的补充有益菌,保证有益细菌的优势地位。
4、 不断补充的有益细菌会不断消耗大量的氧气,而且大棚对虾养殖密度大,对虾生长也需要大量的氧气,如果水体中含氧量不足,水中氧气不足会导致对虾浮头,甚至被憋死,解决最好的办法就是在虾塘中增加增氧机的功率。
改变喂养次数
当大棚内温度降低,平均在20左右时,主要适应在北方,此时如果还跟之前一样的养殖方式的话,虾塘的饲料会有剩余,严重影响的水质。一般水温在25摄氏度以上时我们一天喂5-6次,20-25摄氏度度时我们就一天喂4次,如果20摄氏度以下投喂1到2次,投饵量按虾体重的1.5%左右投喂,每次投饵前要观察水质饵料剩余量,以此投放饲料,少食多餐,以不剩料为好。
对虾室内恒温养殖技术
适宜温度
在环境温度得到控制的前提下,如24~26℃,孵化机最适温度为37.8℃左右,出雏机最适温度为37~37.5℃;若室温不适宜,孵化温度可变化0.5~1℃。
高温影响
高温加速胚胎发育,缩短孵化期,但死亡率增加,雏鸡质量下降。有资料显示,16日龄胚蛋,40.5℃经24小时,孵化率稍有下降;43℃经6小时孵化率有明显下降,9小时后下降更明显;46.0℃经3小时或48.5℃经1小时,所有胚胎将全部死亡。
低温影响
低温下,胚胎发育迟缓,孵化期延长,死亡率增加。如35.5℃时,胚胎大多死于壳内。短时间的降温对孵化效果无不良影响。入孵14天以前,胚胎发育受温度降低的影响较大。孵化过程中,应防止胚胎发育早期(1~7天)在低温下孵化,出雏期间(19~21天)要避免高温。
养鸡技术|孵化小鸡需要的温度
变温孵化与恒温孵化
分批入孵时采用恒温孵化,巷道式孵化机多采用恒温孵化;整批入孵时采用变温孵化,箱体式孵化机多采用变温孵化。
1、变温孵化
根据不同的孵化器、孵化室温度和鸡的胚龄,分别给予不同的孵化温度。孵化室温度22~26℃、湿度50%~60%时,孵化机温度在1~5日时,孵化温度37.8℃,5~11日时,孵化温度37.6℃,11~15日时,孵化温度37.4℃,15~19日时,孵化温度37.2℃,19~21日时,孵化温度37.0℃。
养鸡技术|孵化小鸡需要的温度
2、恒温孵化
恒温孵化法主要是为适应分批入孵而产生的一种孵化方法。同一台孵化器,装有不同胚龄的种蛋,大胚龄种蛋释放的多余热量可被小胚龄种蛋吸收,两者产生互补,充分利用了代谢热,提高了孵化率。如果采用分批入孵,即孵化机有多个胚龄的种蛋,应每隔5~7天上一批种蛋,最好是“新蛋”和“老蛋”的蛋盘交错放置,相互调节温度,使整个孵化期的温度保持恒定。
温度的调节
孵化的最适温度随孵化阶段、品种、蛋重、机器性能、季节、室温等的变化而稍有差异。温度调节的原则就是让胚胎按生长发育规律循序渐进的生长,既不要因为温度过高,胚胎生长发育过快;也不要因为温度偏低,胚胎生长发育缓慢。孵化过程中,通过胚胎照检观察胚胎特征,特别是通过观察胚胎5天“黑眼”、10天“合拢”、17天“封门”三个关键时间点的发育快慢,判断施温是否得当,并及时作出调整改变。此外,要求孵化机各部位温度尽量一致,出雏才更整齐一致。
虾塘加温设备有哪些
1.平时可以多次每亩撒底康2公斤预防和控制底部发热。
千万不要使用含絮凝剂的调水、改底产品,尽可能不要撒微生物到底部,千千万万不要为了水好看而误了大事!
2、在危急的时候,甚至在迫不得已的时候可以撒尿素为底部降温。
一切以水温控制、救命为主要目的,至于其他是否水会太浓、尿素是否会引起氨氮、亚硝酸盐飙升等,你就结合自己换水条件来判断是否可以用尿素降温了。
通过增氧机使用时间控制尽可能降低水温
1、土池没有必要,不要使用底部增氧系统,避免为水加温。
2、早上尽可能早一点开增氧机。
3、下午3点后,如果水温太高了,没必要就不要开水面的增氧机,尽可能避免把上层高温水打到底层。
4、平时的水位尽可能保持在1.6米以上,但是需要配合:多用底康降低底泥耗氧量,多撒增氧剂提高底部溶解氧。
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