水产养殖实验课程，水产养殖大实验

水产养殖实验课程，水产养殖大实验

水产养殖大实验室

什么是土壤酸碱度

土壤酸碱度是土壤溶液的酸碱性强弱的程度，一般用PH值来表示。pH值＜7为酸性，pH值=7为中性，pH值＞7为碱性。

测试酸碱度的方法

电位法：电位法使用酸碱度计，主要为实验室使用，可以精确到小数点后两位。这种仪器是专业测试，这里只作为一个了解。

试纸法：试纸法是测定土壤酸碱度最简单的方法。其方法步骤如下：

第一步：准备PH试纸一盒，取测试的土壤少许晒干；

第二步：取测试土5克左右(约半匙），放进试管或干净的容器中；

第三步：取蒸馏水10毫升左右加入试管中，充分晃动，待溶液澄清；

第四步：取试纸浸入到浸出的溶液中3秒左右。待试纸的颜色发生变化；

第五步：将变色的试纸与试纸盒上自带的PH值颜色表进行比对，即可读取数值

总之，土壤酸碱度的测试方法，可用土壤酸碱度计测量（电位法），也可用试纸测试（比色法），最简单方便的是试纸法。但是试纸法要注意不是随便什么水都可以用，否则会受水的影响产生误差，所以一般要用蒸馏水。以上介绍如有不妥，敬请指正为谢！

水产养殖实验室配备

海鲜池消毒要根据海产养殖的特点，在选择消毒剂时，主要考虑选择能抑制和治疗鱼类细菌性、病原性的寄生和感染，对海产品毒性小无损害，消毒物体易溶于水，在消毒的环境中比较稳定和使用方便常用的消毒剂，比较符合的有丹麦DCW杀菌系统。

水产养殖大实验室仪器设备

我们应用PCR技术，放大EHP的18SrRNA基因，再用标记地可辛的探针探测原位杂交细胞中被感染的EHP，最后开发新的PCR技术探测对虾组织，排泄物和水中的EHP。

2.材料和方法

2.1对虾

2006年在文莱收集了感染对虾肠孢子虫（EHP）的南美兰对虾。2014年和2015年在越南虾塘里收集了感染EHP的南美白对虾。2014年，从泰国运送了一批南美兰对虾到我们亚利桑那大学的实验室进行隔离检测，这些对虾后来被检测出感染了EHP，它们的肝胰腺，排泄物和水进行了PCR技术取样检测。

为了检测原位杂交（ISH），并通过PCR技术分析EHP的特异性，研究人员使用了具有棉虾病临床症状的斑节对虾样本，这些对虾来自2005年（固定组织）和2006年（冰冻组织）的马达加斯加。还使用了感染了鳄组织变形虫的南美白对虾，这些虾是在2014年收集到的。通过PCR技术分析，肝胰腺组织或者整只对虾被保护在95%的酒精当中或被风干后送往我们实验室。通过原位杂交技术，用戴维森固定法将虾固定。

2.2.DNA提取

从感染EHP的对虾中去除肝胰腺，（4-5只虾）放进一个样本中。装运感染EHP的对虾的虾槽中对排泄物和水进行了取样。利用MicrosepAdvance离心装置（PALL公司）将虾槽里的水浓缩150倍，用于DNA提取。用一种高纯度DNA模板制备工具（RocheBioscience）或Maxwell-16Cell LEV DNA纯化试剂盒（Promega）。

为了测试EHP引物的特异性，PCR扩增检测两种寄生虫病中的DNA：

（1）棉虾病，2006年从马达加斯加收集了斑节对虾，这些虾的肌肉变白，通过rRNA基因测序，发现它们的DNA呈阴性，因为内有类似于匹里虫的微孢子虫（GenBankkp825331号）；

（2）变形虫病，这些南美白对虾大量死亡，通过组织学检查，最后发现这些虾感染了变形虫（种类不确定）。

为了保证EHP引物没有宿主基因组的反应，制备DNA模板：

（1）来自美国夏威夷的无特定病原（SPF）的南美白对虾（>10样本）、斑节对虾（3个样本）；

（2）来自沙特阿拉伯的印度对虾（2个样本）；

（3）在新喀里多尼亚养殖的南美兰对虾（2个样本）；

（4）来自菲律宾的罗氏沼虾（2个样本）；

（5）沙特阿拉伯附近虾塘里采集的蟹（7个样本，未知的物种）；

（6）多毛类（3个样本），卤虫生物量（9个样本），鱿鱼（2个样本），磷虾（2个样本），这些是从各种商业供应商运送。

2.3.18S rRNA基因扩增和克隆

PCR检测技术，使用了PuReTaqReady-To-Go珠（GE医疗）。扩增18SrRNA基因的引物18S-F（5’-CACCAGGTTGATTCTGCCTGA）和18S-R（5’-TCTGAAATAGTACGGGCGG）。PCR反应中包含200微米dNTP，0.2微米引物，10mM Tris-HCl（pH9.0）,50毫米氯化钾，1.5毫米氯化镁，2.5U Taq DNA聚合酶和1微升提取的DNA（10纳克至100纳克每微升）。放大进行下列循环参数：到达94°C进行初始化3分钟，然后94°C温度下进行30秒，55°C温度下进行30秒，72°C温度下进行1分钟，做35个此循环周期，并在最后一个周期停留在72°C温度下5分钟。在一个含有溴化乙锭的1.2%琼脂糖凝胶中电泳分析PCR产物。在?1KB一带切除和提取DNA，克隆到pGEM-T-easy载体（Promega）上，命名为克隆pEHP-1。通过DNA测序，克隆的插入为1146bp（GenBankNo.kp759285）。国家生物技术信息中心（NCBI）使用BLAST序列数据库对GenBank的相似序列进行了搜索。

2.4、探针标记和原位杂交

克隆pEHP-1质粒DNA被用来做成原位杂交时的一个探针。Mari等人描述，在PCR反应中，使用了digoxigenin-11-dutp（Roche）标记的基因探针（1998）。用于标记反应的引物EHP-F（5’-GGGAACGACGAACGGCTCAG）和EHP-R1（5’-TGCCTTGATGAGACACTGTT）产生一个1.1 kb的片段。digoxigenin标记的DNA探针，用乙醇沉淀，悬浮在水中，并存储在-20°C。棉虾病，感染了类似于匹里虫的微孢子虫的探针如微孢子虫，是从一个克隆的16SRNA基因区域产生。

戴维森的AFA固定虾进行了处理，石蜡包埋，按照标准方法切片（4微米厚）（莱特纳，1996）。经过脱蜡，水化，蛋白酶K消化，和后固定，切片浸泡在用500微升的杂交液中（4×SSC，50%甲酰胺，1×登哈特的溶液，5%硫酸葡聚糖，0.5微克/毫升鲑鱼精DNA），这种杂交液中含有EHP探针含（0.2μg/ml）。切片放在90°C加热表面上10min，然后在42°C温度下进行一夜的杂交。最终采用硝基蓝四氮唑，5-溴-4-磷酸进行检测抗地高辛抗体共轭碱性磷酸酶（罗氏）。

2.5.EHP的PCR检测。

PCR检测技术，使用了PuReTaqReady-To-Go珠（GE医疗）。探测EHP的引物是EHP-510F(5’-GCCTGAGAGATGGCTCCCACGT)和EHP-510R(5’-GCGTACTATCCCCAGAGCCCGA)。放大进行下列循环参数：到达94°C进行初始化3分钟，然后94°C温度下进行30秒，60°C温度下进行30秒，72°C温度下进行30秒，做35个此循环周期，并在最后一个周期停留在72°C温度下5分钟。

3.结论与讨论

3.1临床症状与EHP感染史

目前，养殖对虾过程中所发生的EHP感染还没有特定的的临床症状。EHP感染通常与发育不良和死亡率上升有关。根据越南境内的鱼塘数据（虾农个人提供的数据）：把感染后的虾苗放入虾塘后的前25天时间内，对虾生长速度正常，之后，对虾的健康状况开始恶化；受感染的对虾饲料进食量减少（50-70%），肝胰脏变色。对虾受到感染之后，其体型（即重量，每周进行一次称重）仅为健康对虾的10-40%。对虾EHP感染死亡率并非一成不变，根据养殖场统计，对虾每天的死亡率约为1?2%。在实验室测定过程中，对虾EHP死亡率并无显著上升，（Tangprasittipap，2013），由于测定持续周期较短（7天），有可能无法检测出死亡率的大幅变化。情况较为严重的EHP感染可能会增加其他细菌感染的易感性。我们发现，在某些情况下，EHP通常伴有弧菌机会性感染（也称为感染性肝胰腺坏死），这可能会导致增加对虾死亡率。

水产养殖大实验室配备

梅山校区也是属于宁波大学的。一个学校所以专业是共享的 全部应该有的专业都有的。

学、计算机科学与技术、英语、机械设计制造及其自动化都是宁波大学的王牌专业。排在第一是力学，力学是宁波大学入选世界一流学科建设一流学科名单（双一流学科）。对应的专业为“工程力学”（隶属于机械学院）是目前宁波大学学科建设中的王牌专业。之后为“水产养殖学”，学水产养殖学的学生是生活在梅山校区（新校区，靠海）。这个专业有一个院士，而且在大黄鱼养殖上宁波大学比较强。之后几个专业差不多。临床医学（专业为985大学的水平）比较牛，但学起来很痛苦，宁波大学有校友捐赠高水平的医学实验室及医学仪器（很多大学都没有），这是宁波大学在这专业的极大优势。至于英语、机械设计制造及其自动化、体育教育、水产养殖学，法学为传统的强势专业，计算机科学与技术这个专业中的“通信工程”比较厉害，其他的小类就一般般了。通信工程（海洋通信）在宁波大学发展前景比较好（非常受领导重视），因为宁波大学有志于将宁波大学成建设世界公认的海洋工程领域人才培养基地，海上信息与通信工程正是宁波大学努力的方向。

水产实验室及设备

鱼安定好。

鱼安定是一个化合物的商品名，CAS：886-86-2，分子式：C10H15NO5S。为白色结晶或粉末，熔点149.5℃，易溶于淡水或海水中（10克/100ml）。水溶液透明无色，呈微酸性、耐高温。

作为美国FDA批准的活鱼运输麻醉剂，MS-222具有镇静作用，在美国用于三文鱼的长途运输，以保证三文鱼在运输过程中的存活率以及上市的新鲜度。

此外，MS-222还用于各种水产品的实验室研究领域，是一种很好的实验用鱼手术麻醉剂。

水产养殖研究所

简介：湖南省水产科学研究所（Hunan Fisheries Science Institute）成立于1959年12月，归口管理湖南鱼类原种场、湖南中华鳖原种场和湖南鳜鱼原种场。

研究所主要从事鱼类育种、鱼病防治、水产饲料、特种水产养殖、淡水珍珠养殖、大水面增养殖及水产品加工的研究与应用，特别是鱼类良种繁育、鱼类杂交育种、特种水产养殖及淡水珍珠养殖技术。据2018年1月研究所官网资料显示，研究所共有干职工134人，下设6个综合科室和7个机构 。注册资本：7213.7万人民币

水产养殖大实验室是干嘛的

海南大学水产养殖学专业被批准为第一类高等学校特色专业建设点 是不错的专业

海南大学水产养殖学科是海南省首批批准设立的省级重点学科，有热带水产养殖生物生殖调控与繁育、热带水产养殖生物遗传育种、热带水产养殖生物病害与控制、热带水产养殖生物开发利用生物技术等四个重点研究方向，设有水产养殖学硕士点和农业（渔业领域）推广硕士点。学科建设目标主要是从分子生物学科技水平上研究具有鲜明热带特色的海南优势水产养殖产品为主的重要经济海洋生物的种质资源、遗传种质改良和苗种繁育技术、增养殖技术和病害防治技术、海洋生物生理活性物质开发等，为热带海洋生物资源的保护和可持续利用提供创新性应用性的高新科技成果，培养高素质人才，推进水产养殖产业化和现代化。

本学科集中了海南省全部在职的水产养殖专业正高职称技术人员，已形成一支梯队结构合理、科研能力强、学术水平较高、年轻化的科研教学力量。本学科现有专业教师28名，其中有正、副高职称教师各11名，占教师总数的78%；有博士学位者12名，占43%；有国家级有突出贡献中青年专家1人、新世纪“百千万人才工程”国家级人才2人、国家跨世纪人才1人、享受国务院和省政府津贴专家5人、全国先进工作者2人、全国优秀教师3人和海南省青年教师教学大赛“教学十佳”1人。此外，本学科还有双聘院士1名，兼职教授6名。学科队伍年富力强，团结奋进，是全国总工会命名的“全国先进班组”，荣获“五一劳动奖状”。

通过近年的校、省两级重点学科建设，海洋实验大楼、校生物技术实验中心、理化测试中心和教育部热带生物资源重点实验室的建设，分子生物学方向的仪器设备和实验室设施条件已达到全国先进水平。本学科还设有“教育部热带生物资源重点实验室热带水生生物技术研究室”、“海南省热带水生生物技术重点实验室”和“海南-东盟热带海洋生物科技合作基地”，大大增强了水产养殖学科的基础研究和应用开发能力。

2002-2007年学科建设五年来，水产养殖学科共承担国家和部、省级重大科研项目77项，经费2747万元，其中国家和部级重大科技项目42项，经费2095万元。其中承担和完成国家“863”和“科技支撑”高技术项目《名贵海水鱼类苗种规模化繁育技术》等14项、国家自然科学基金课题《马氏珠母贝养殖群体对海南岛东部野生种群遗传多样性的影响》等16项(其中国际合作3项)、部级重大科技项目《海水养殖鱼虾病害的免疫防治研究》等27 项(其中国际合作10项)。科研成果丰硕，获得国家科技进步二等奖等各类科技进步奖14项，专利11项，通过国家或省级鉴定、验收的科技成果32项。主编出版专著17部，发表学术论文共280多篇。本学科十分注重科技成果的产业化建设，设有“产学研”基地4处，实现了成果的产业化生产。马氏珠母贝海大“海优1号”育苗和养殖技术已在广东、广西和海南大面积推广应用；《点带石斑鱼规模化人工繁育技术研究》累计亲鱼产卵5317.5千克，育苗761.1万尾，实现了点带石斑鱼规模化人工繁育，成果总体达到国际先进水平，以“碎屑食物链”为基础的点带石斑鱼工厂化育苗技术属于国内外首创。国家领导人曾多次视察学科的产业化基地。学科建设大大推进了教学质量、科研水平和为社会服务能力的提高，增强了教师和学生的。学生毕业论文质量高，优良率达80%；四年级学生论文在国家和省级学术刊物上发表率达32.8%，多名学生的论文在全国大学生“挑战杯”大赛中获奖。本科毕业生初次就业率高达90%以上，硕士研究生考取博士生录取率和就业率高，已成为海南水产养殖业的主要科技支撑力量。

2005年海南省教育厅主持组织省内外专家对学科的建设进行现场评审验收认为，“该学科通过五年的努力，已超额完成重点学科目标建设计划任务书中的各项指标，达到了国内热带水产养殖学科的领先水平。该学科的建设还带动了海洋药物工程专业和海洋学院的发展。专家组一致同意通过验收，建议考核结果为优秀。”

本学科的责任教授（学科带头人）是张本，国务院1979年、1995年先后授予“全国劳动模范”和“全国先进工作者”光荣称号，是人事部1990年选拔的“国家有突出贡献中青年专家”，荣获国家科技进步二等奖（第一完成人）等16项省部级以上的科技奖励。

养鸡

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