鸡胚孵化和鸡胚病毒接种有哪些关键因素和步骤，病毒的鸡胚培养应选几日龄的鸡胚
鸡胚孵化和鸡胚病毒接种有哪些关键因素和步骤
[实验材料]
白壳鸡胚、孵化箱、1mL注射器、蛋架、新城疫工系和Ⅱ系弱毒苗等。
[实验准备]
1．鸡胚的选择和孵化应选健康无病鸡群或SPF鸡群的新鲜受精蛋。为便于照蛋观察，以来航鸡蛋或其他白壳蛋为好。用孵卵箱孵化，要特别注意温度、湿度和翻蛋。孵化条件一般选择相对湿度为60％，最低温度36℃，一般37．5℃。每日翻蛋最少3次，开始可以将鸡胚横放，在接种前2d立放，大头向上，注意鸡胚位置，如胚胎偏在一边易死亡。
孵化3～4d，可用照蛋器在暗室观察。鸡胚发育正常时，可见清晰的血管及活的鸡胚，血管及其主要分枝均明显，呈鲜红色，鸡胚可以活动。未受精和死胚胚体固定在一端不动，看不到血管或血管消散，应剔除。鸡胚的日龄根据接种途径和接种材料而定，卵黄囊接种，用6～8日龄的鸡胚；绒毛尿囊腔接种，用9～10日龄鸡胚；绒毛尿囊膜接种，用9～13日龄的鸡胚；血管注射，用12～13日龄鸡胚；羊膜腔和脑内注射，用10日龄鸡胚。
2．接种前的准备
病毒接种材料的处理怀疑污染细菌的液体材料，加抗生素(antibiotic)(青霉素100～500IU和链霉素100～500μg)置室温中1h或冰箱12～24h高速离心取上清液，或经滤器滤过除菌。如为患病动物组织，应剪碎、研磨、离心取上清液，必要时加抗生素(antibiotic)处理或滤过。
照蛋以铅笔划出气室、胚胎的位置(图12―1)，若要作卵黄囊接种或血管注射，还要划出相应的部位。
打孔用碘酊在接种处的蛋壳上消毒，并在该处打孔。
[鸡胚的接种]
鸡胚接种一般用结核菌素注射器注射，注射完后均应用熔化的石蜡将接种孔封闭。
1．绒毛尿囊腔内注射取9～10日龄鸡胚，用锥子在酒精灯火焰烧灼消毒后，在气室顶端和气室下沿无血管处各钻一小孔，针头从气室下沿小孔处插入，深1．5cm，即已穿过了外壳膜且距胚胎有半指距离(图12―2)，注射量约O．1～O．2mL。注射后以石蜡封闭小孔，置孵育箱中直立孵育。
2．卵黄囊内注射取6～8日龄鸡胚，可从气室顶侧接种(针头插入3～3．5cm)，因胚胎及卵黄囊位置已定，也可从侧面钻孔，将针头插入卵黄囊接种。侧面接种不易伤及鸡胚，但针头拔出后部分接种液有时会外溢，需用酒精棉球擦去。其余同尿囊腔内注射(图12―3)。
3．绒毛尿囊膜接种
人工气室法(图12―4)取10～11日龄鸡胚，先在照蛋灯下检查鸡胚发育状况，划出气室位置，并选择绒尿膜发育区作一“记号”。将胚蛋横卧于蛋座上，绒尿膜发育区“记号”朝上。用碘酒消毒记号处及气室中心部，在气室中心部锥小孔。然后用锥子轻锥记号处蛋壳，约0.5mm深，使其卵壳穿孔而壳膜不破。用洗耳球吸去气室部空气的同时，随即因上面小孔进入空气而绒尿膜陷下形成一个人工气室，天然气室消失(如图12―4)。接种时针头与卵壳成直角。自上面小孔直刺破卵膜进入人工气室约3～5mm，注入0．1～0．2mL病料，正好在绒尿膜上。接种完毕用熔化石蜡封闭两孔，人工气室向上，横卧于孵化箱中，逐日观察。
直接接种法将鸡胚直立于蛋座上，气室向上，气室区中央消毒打孔，用针头刺破壳膜，接种时针头先刺人卵壳约0．5cm，将病料滴在气室内的壳膜上(0．1～O．2mL)，再继续刺入约1．0～1．5cm(图12―5)，拔出针头使病料液即慢慢渗透到气室下面的绒尿膜上，然后用石蜡封孔，放人孵化箱培养。本方法的原理为：壳膜脆，刺破后不能再闭合，而绒尿膜有弹性，当针头拔出后被刺破的小孔立即又闭
4．羊膜腔内接种所用鸡胚为10日龄，有两种方法。
开窗法从气室处去蛋壳开窗，从窗口用小镊子剥开蛋膜，一手用平头镊子夹住羊膜腔并向上提，另一手注射0．05～0．1mL病料液人腔内，然后封闭人工窗，使蛋直立孵化，此法可靠，但胚胎易受伤而死，而且易污染。
盲刺法将鸡胚放在灯光向上照射的蛋座上，将蛋转动使胚胎面向术者。在气室顶部到边缘的一半处打一孔，用40mm长的针头垂直插入，约深30ram以上。如已刺入羊膜腔，能使针头拨动胚即可注入病料液0．1～0．2mL，如针头左右移动时胚胎随着移动，则针头已刺人胚胎，这时应将针头稍稍提起后再注射(图12―6)。拔出针头后石蜡封闭小孔。置孵化箱中培养。
[接种后检查]
接种后24h内死亡的鸡胚，系由于接种时鸡胚受损或其他原因而死亡，应该弃去，24h后，每天照蛋2次，如发现鸡胚死亡立即放入冰箱，于一定时间内不能致死的鸡胚亦放入冰箱冻死。死亡的鸡胚置冰箱中1～2h即可取出收取材料并检查鸡胚病变。
孵蛋过程是什么？
母鸡孵蛋的过程：
1、选择种鸡
要选择适合当地饲养的品种作为种鸡，种鸡年龄一般1~3周年为佳，随着种鸡年龄的增大，会降低其受精率而影响孵化率。
2、选好种蛋
在实践中种鸡所产的鸡蛋并非全部是种蛋，其品质的优良与否，对孵化率的高低和雏鸡的质量都有很大的影响。
3、做孵化窝
孵化窝最好设在“懒孵”母鸡的“懒孵”处，若“懒孵”处还有其他母鸡下蛋，就应该另做孵化窝。
4、清盘
鸡孵化到20。5天大批破壳出雏，整批孵化的只要捡2次雏即可清盘；分批入孵种蛋的，由于出雏不齐则每隔4 ～6小时捡一次。
2、疫苗
等到最后一只胚胎蛋出壳后，一窝可爱且健康的小雏鸡即孵化成功。鸡苗出壳24小时内做马立克疫苗免疫并在最短时间内将雏鸡运到育雏舍。完成。
养鸡
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