对虾淡水养殖需加多少氯化钾,南美对虾淡水养殖需加多少氯化钾
对虾淡水养殖需加多少氯化钾肥
我们应用PCR技术,放大EHP的18SrRNA基因,再用标记地可辛的探针探测原位杂交细胞中被感染的EHP,最后开发新的PCR技术探测对虾组织,排泄物和水中的EHP。
2.材料和方法
2.1对虾
2006年在文莱收集了感染对虾肠孢子虫(EHP)的南美兰对虾。2014年和2015年在越南虾塘里收集了感染EHP的南美白对虾。2014年,从泰国运送了一批南美兰对虾到我们亚利桑那大学的实验室进行隔离检测,这些对虾后来被检测出感染了EHP,它们的肝胰腺,排泄物和水进行了PCR技术取样检测。
为了检测原位杂交(ISH),并通过PCR技术分析EHP的特异性,研究人员使用了具有棉虾病临床症状的斑节对虾样本,这些对虾来自2005年(固定组织)和2006年(冰冻组织)的马达加斯加。还使用了感染了鳄组织变形虫的南美白对虾,这些虾是在2014年收集到的。通过PCR技术分析,肝胰腺组织或者整只对虾被保护在95%的酒精当中或被风干后送往我们实验室。通过原位杂交技术,用戴维森固定法将虾固定。
2.2.DNA提取
从感染EHP的对虾中去除肝胰腺,(4-5只虾)放进一个样本中。装运感染EHP的对虾的虾槽中对排泄物和水进行了取样。利用MicrosepAdvance离心装置(PALL公司)将虾槽里的水浓缩150倍,用于DNA提取。用一种高纯度DNA模板制备工具(RocheBioscience)或Maxwell-16Cell LEV DNA纯化试剂盒(Promega)。
为了测试EHP引物的特异性,PCR扩增检测两种寄生虫病中的DNA:
(1)棉虾病,2006年从马达加斯加收集了斑节对虾,这些虾的肌肉变白,通过rRNA基因测序,发现它们的DNA呈阴性,因为内有类似于匹里虫的微孢子虫(GenBankkp825331号);
(2)变形虫病,这些南美白对虾大量死亡,通过组织学检查,最后发现这些虾感染了变形虫(种类不确定)。
为了保证EHP引物没有宿主基因组的反应,制备DNA模板:
(1)来自美国夏威夷的无特定病原(SPF)的南美白对虾(>10样本)、斑节对虾(3个样本);
(2)来自沙特阿拉伯的印度对虾(2个样本);
(3)在新喀里多尼亚养殖的南美兰对虾(2个样本);
(4)来自菲律宾的罗氏沼虾(2个样本);
(5)沙特阿拉伯附近虾塘里采集的蟹(7个样本,未知的物种);
(6)多毛类(3个样本),卤虫生物量(9个样本),鱿鱼(2个样本),磷虾(2个样本),这些是从各种商业供应商运送。
2.3.18S rRNA基因扩增和克隆
PCR检测技术,使用了PuReTaqReady-To-Go珠(GE医疗)。扩增18SrRNA基因的引物18S-F(5’-CACCAGGTTGATTCTGCCTGA)和18S-R(5’-TCTGAAATAGTACGGGCGG)。PCR反应中包含200微米dNTP,0.2微米引物,10mM Tris-HCl(pH9.0),50毫米氯化钾,1.5毫米氯化镁,2.5U Taq DNA聚合酶和1微升提取的DNA(10纳克至100纳克每微升)。放大进行下列循环参数:到达94°C进行初始化3分钟,然后94°C温度下进行30秒,55°C温度下进行30秒,72°C温度下进行1分钟,做35个此循环周期,并在最后一个周期停留在72°C温度下5分钟。在一个含有溴化乙锭的1.2%琼脂糖凝胶中电泳分析PCR产物。在?1KB一带切除和提取DNA,克隆到pGEM-T-easy载体(Promega)上,命名为克隆pEHP-1。通过DNA测序,克隆的插入为1146bp(GenBankNo.kp759285)。国家生物技术信息中心(NCBI)使用BLAST序列数据库对GenBank的相似序列进行了搜索。
2.4、探针标记和原位杂交
克隆pEHP-1质粒DNA被用来做成原位杂交时的一个探针。Mari等人描述,在PCR反应中,使用了digoxigenin-11-dutp(Roche)标记的基因探针(1998)。用于标记反应的引物EHP-F(5’-GGGAACGACGAACGGCTCAG)和EHP-R1(5’-TGCCTTGATGAGACACTGTT)产生一个1.1 kb的片段。digoxigenin标记的DNA探针,用乙醇沉淀,悬浮在水中,并存储在-20°C。棉虾病,感染了类似于匹里虫的微孢子虫的探针如微孢子虫,是从一个克隆的16SRNA基因区域产生。
戴维森的AFA固定虾进行了处理,石蜡包埋,按照标准方法切片(4微米厚)(莱特纳,1996)。经过脱蜡,水化,蛋白酶K消化,和后固定,切片浸泡在用500微升的杂交液中(4×SSC,50%甲酰胺,1×登哈特的溶液,5%硫酸葡聚糖,0.5微克/毫升鲑鱼精DNA),这种杂交液中含有EHP探针含(0.2μg/ml)。切片放在90°C加热表面上10min,然后在42°C温度下进行一夜的杂交。最终采用硝基蓝四氮唑,5-溴-4-磷酸进行检测抗地高辛抗体共轭碱性磷酸酶(罗氏)。
2.5.EHP的PCR检测。
PCR检测技术,使用了PuReTaqReady-To-Go珠(GE医疗)。探测EHP的引物是EHP-510F(5’-GCCTGAGAGATGGCTCCCACGT)和EHP-510R(5’-GCGTACTATCCCCAGAGCCCGA)。放大进行下列循环参数:到达94°C进行初始化3分钟,然后94°C温度下进行30秒,60°C温度下进行30秒,72°C温度下进行30秒,做35个此循环周期,并在最后一个周期停留在72°C温度下5分钟。
3.结论与讨论
3.1临床症状与EHP感染史
目前,养殖对虾过程中所发生的EHP感染还没有特定的的临床症状。EHP感染通常与发育不良和死亡率上升有关。根据越南境内的鱼塘数据(虾农个人提供的数据):把感染后的虾苗放入虾塘后的前25天时间内,对虾生长速度正常,之后,对虾的健康状况开始恶化;受感染的对虾饲料进食量减少(50-70%),肝胰脏变色。对虾受到感染之后,其体型(即重量,每周进行一次称重)仅为健康对虾的10-40%。对虾EHP感染死亡率并非一成不变,根据养殖场统计,对虾每天的死亡率约为1?2%。在实验室测定过程中,对虾EHP死亡率并无显著上升,(Tangprasittipap,2013),由于测定持续周期较短(7天),有可能无法检测出死亡率的大幅变化。情况较为严重的EHP感染可能会增加其他细菌感染的易感性。我们发现,在某些情况下,EHP通常伴有弧菌机会性感染(也称为感染性肝胰腺坏死),这可能会导致增加对虾死亡率。
对虾养殖氯化钾的用量
虾里面含钾是每100克虾里含228mg钾
虾的含钾量不高,钙和蛋白质的含量比较高,而且大虾中的蛋白质属于是优质蛋白,热量不高,蛋白质参与人体的基础代谢,需要每天从饮食中补充,如果蛋白质摄入不足,容易引起免疫力低下,甚至是出现浮肿,平时一定要注意饮食结构要多样化,才可以补充多种营养素。
对虾养殖如何肥水
20亩虾田需要化肥:复合肥对虾塘进行肥水20斤,同时还要再施用40斤尿素和10磷肥。肥水后可以培育池塘内的浮游藻类,为虾类提供天然饵料,还可以提高放苗后的成活率。
而放苗后对池塘进行肥水应以少量多次为宜,同时要少用、慎用尿素等氮肥,以免池塘内的氨氮含量过高
氯化钾在虾养殖中一亩放多少
养虾亚酸盐过高处理1、可以通过生物平衡处理,因为亚硝酸盐高是有原因的,应该是水体微生物不平衡导致的。水养到一定程度的话,水中会有硝化菌,硝化菌里又有亚硝酸菌。硝化菌会把水中的对鱼虾有害的氨,转化成危害稍小的亚硝酸盐,这时亚硝酸菌会把亚硝酸盐转化成基本无毒的硝酸盐。2、可以通过化学处理,就是我们常说的虾药,但现在市面上的虾药很多种,如果用请注意选择。因为养殖水体不是单一的问题。用化学虾药要考虑会不会产生副作用。比如,降低了亚硝酸盐,有可能会大量消耗水体中的氧气,这是对是不利的。亚硝酸盐,一类无机化合物的总称。主要指亚硝酸钠,亚硝酸钠为白色至淡黄色粉末或颗粒状,味微咸,易溶于水。硝酸盐和亚硝酸盐广泛存在于人类环境中,是自然界中最普遍的含氮化合物[1]。人体内硝酸盐在微生物的作用下可还原为亚硝酸盐,N-亚硝基化合物的前体物质。
养虾加氯化钾作用
100斤水配百分之3到百分之3.5之间海水晶就可以了,海水晶是海水及盐化工的产物,主要是通过对海水或卤水进行蒸发、离心、浓缩等一系列过程而生产出来的。
养虾海水晶和淡水的比例一般为每100公斤淡水兑3公斤海水晶。在海产品代养期间,调配人工海水需要模拟海水的组成元素,海水晶主要是由氯化钠、氯化钾、氯化钙和硫酸镁4个主要元素组成,一般情况下,在海鲜暂养期间,兑海水时需要满足这几个基本元素。
淡水养虾前期用撒氯化钾吗
盐度:
海水中全部溶解固体与海水重量之比,也就是说1千克海水所含有的溶解物质之比,包括氯化钠、氯化镁、硫酸镁、氯化钙、氯化钾、硼酸、溴化钾等。
1、盐度小于0.5‰的叫淡水,盐度0.5‰-30‰的叫淡咸水。
2、对虾对盐度的适应范围0.2‰—34‰。低于0.2‰对虾蜕壳、换壳困难很难长大、易死亡;高于34‰对虾易脱水而死-渴死。所以内陆淡水养殖最好用海盐(海水晒干的粗盐)或海水晶每亩600-800斤泼洒,把盐度提高到0.5‰左右,养殖成功率就比较高。
3、盐度18‰时对虾生长速度最快,成活率最高,饵料系数最低。在盐底低于10‰时对虾为了维持体内细胞与水体渗透压的平衡而消耗大量的能量而景响生长。实验表明对虾在10‰时成活率为86%,对虾在6‰时成活率为77%。为何?因为盐度低时水体钙镁不足,对虾蜕壳后硬壳缓慢,易被同类吃掉或感染病菌,导致成活率下降。所以定期调节盐度、泼洒矿物元素很重要。但盐度低也有个好处,盐度低于5‰时,弧菌不易超标。
在纯淡水只需要26.5的蛋白就能满足对虾的生长需求够,但盐度高的水体则需要到38个蛋白以上才行,盐度越高,需要饲料的蛋白质含量越高。
4、淡水养殖最重要的步骤就是配制人工海水来淡化标粗以及把养殖池总盐度提高到0.5‰,以提高养殖成活率
对虾淡水养殖需加多少氯化钾肥合适
总碱度为水质变动的缓冲因子。
水产养殖最适总碱度范围在75 – 200 ppm之间。
池水的总碱度太低,水的酸碱度的日变化幅度大,可能会过高(下午)或过低(清晨)。0 水的酸碱度稳定,则水中营养盐可利用性高,有利于浮游植物如藻类的稳定生长。
总碱度高,水中的重金属如铜、锌的毒性降低。
淡水或低盐度养殖对虾,最低总碱度要求为75 ppm。
海水养殖对虾,最低总碱度要求为100 ppm。
在虾病流行季节或雨季,池水总碱度最好调高到120 – 150 ppm。
育苗用水的总碱度最好调高到120 ppm以上。
如何调高总碱度
最常见的使用普通石灰(碳酸钙)或白云石粉(一般添加量为10~30公斤/亩),宜少量多闪地泼洒使用,在泼洒的过程中,需要不断检测验证总碱度,直到达到要求的80~150PPM为止,提高总碱度同时也补充了钙镁离子等,一举二用,且不改变水的酸碱度,这是第一梯队的调高总碱度的产品。
然后同时也可以使用小苏打粉调节总碱度提高,用量为5~10公斤左右,少量多次泼洒为宜,也需要检测验证为准,小苏打粉直接提供水中重碳酸根离子,直接提高总碱度,但在水体中富营养化,水中酸质有机物质和重金属离子(或总硬度过高时)比较多的时候,他的调节效果不太明显,有的人不断加了小苏打,也未必能提高总碱度,因为小苏打粉中的重碳酸根离子会直接与这些物质结合,而造成最终事实上并没有给水体增加重碳酸根离子。
使用生石灰(CaO)也可以提高总碱度(提供OH-1),但生石灰接触到水会产生热量及提高水的酸碱度【CaO + H2O = Ca(OH)2 = Ca+2 + 2OH-1】。除非水的酸碱度太低,使用生石灰提高总碱度同时提高酸碱度。但池水中已经有养殖物,则使用生石灰必须小心慎重。宜5公斤/亩/次地泼洒为宜。
使用熟石灰【Ca(OH)2】也可以提高总碱度(提供OH-1),但水的酸碱度会随之提高,对养殖物可能造成过大应激,因此使用上必须小心谨慎。这种饱和石灰水,宜20公斤/亩/天地泼洒为宜,少量多次。
在雨季时,最好维持养殖池壁一层普通石灰或白云石粉,使雨水将石灰带入池水中,以稳定总碱度;千万不可在暴雨之后立即往池水中撒布石灰,以避免养殖物遭受两次连续应激。
以笔者经验,淡水井水等总硬度高,宜用小苏打,每调高总碱度如果在30~40以上,最少每亩要加10公斤小苏打,还要加碳酸钙和氯化钾和硫酸镁,氯化钾的添加量一亩不少于2kg,硫酸镁不少于3公斤/亩。淡水是要加很多微量元素,特别是镁,钾;
对虾养殖氯化钙氯化钾硫酸镁配比
硬度是和碱度是相似的参数,但是其实是不同的测量方法。硬度测量包括钙镁离子,铝离子,铁离子,锌离子,有时候也包括锶锰离子和氢离子。当水环境中的硬度水平等于碱度水平时,这种硬度叫碳酸硬度,而当硬度水平大于碱度水平时,这种硬度叫做非碱硬度。水环境中,硬度高些更适宜对虾生长。
总硬度低的池塘情况
1、 很少用石灰清塘的池塘;
2、 养殖过程中很少使用石灰的水体;
3、养殖几年的珍珠蚌的水体,包括鱼蚌混养的水体;
4、软水地区的水体;
5、高密度养殖水体;
6、 普通池塘养殖中后期;
7、 红树林地区(海南、广西、广东、福建)池塘,养石斑鱼的池塘;
8、底泥为青色或底泥很黏的水体;
9、种植并经常收割水生植物的池塘等。
硬度对南美白对虾水体主要作用
1、水体中的Ca2+、Mg2+与水生生物的生命活动有密切关系。钙是动物骨骼、甲壳及植物细胞壁的重要组成元素之一,缺钙会引起动植物生长发育不良,特别是限制藻类的繁殖。镁元素是叶绿素中的成分,在糖代谢中起到重要作用,缺镁植物细胞内的核糖核酸合成将停止,氮代谢紊乱,缺镁也会影响藻类对钙的吸收;
2、增加水质的缓冲性。若水质总硬度在350~500mg/L(以CaCo3计)时,水质、底质的pH值较稳定,抗天气变化能力强,因此保护水体硬度是对抗底质老化和酸化的主要手段;
3、降低重金属的毒性。水质硬度较高时,钙镁离子与重金属离子产生拮抗作用,减少对虾对金属离子的吸收,从而降低它的毒性;
4、养殖海水中有足够的Ca2+、Mg2+含量可促进有机物絮凝、聚沉,促进固氮及其它微生物活动,加速有机物质的矿化作用,加快无机物质的循环和再生,缓解水质和底质的酸化;
5、水体硬度不足,对虾脱壳、固壳生理活动受阻,因而出现脱壳难和软壳现象,水体硬度不足是导致对虾发病的主要原因之一。因此,水体的硬度在养殖中非常重要,不单对有机物转化,降低有毒物质的毒性有重要作用,对藻类和对虾生长发育都具有不可替代的作用。
人工高密度养殖条件下,水体中往往缺乏钙、镁、磷等微量元素。因此,在对虾养殖过程中要不定期地在水体中添加磷酸氢钙和硫酸镁或键壳素来提高水体硬度,还可通过对虾鳃膜滤透方式从水体中得到钙、镁、磷等微量元素,缩短甲壳的硬化过程,防止脱壳不遂和软壳,从而确保对虾健康生长。磷酸氢钙和硫酸镁又是最好的肥料,能促进藻类的生长繁殖,稳定pH值,促进藻相和茵相的平衡。可根据测定水体硬度来施用,按每亩1m水深每次施用磷酸氢钙1.5kg,硫酸镁2kg。
对虾淡水养殖需加多少氯化钾肥料
淡水养殖每亩池塘泼洒500g的硫酸镁。
淡水养殖对虾的生长速度较快,需保持水中的盐度为15%,可溶性钾离子浓度为50mg/L,可溶性钙离子浓度为100mg/L,可溶性镁离子浓度为100mg/L。
在泼洒时,一般按照氯化钙:硫酸镁:氯化钾=10:1:1的比例,每亩池塘泼洒3-5kg的氯化钙,如果想要对虾的生长速度较快,需保持水中的盐度为15%,可溶性钾离子浓度为50mg/L,可溶性钙离子浓度为100mg/L,可溶性镁离子浓度为100mg/L。
4、在泼洒时,一般按照氯化钙:硫酸镁:氯化钾=10:1:1的比例,每亩池塘泼洒3-5kg的氯化钙,500g的硫酸镁,500g的氯化钾。
5、钾离子浓度为150mg/L时,对虾成活率高,钾离子浓度为50mg/L时,对虾生长速度快。
养虾
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